CRISPR/Cas9基因編輯技術不僅引起了基因編輯領域的一場革命,也為基因治療開辟了廣泛的應用前景。其原理是通過將編碼Cas9和sgRNA的片段通過質粒或其它途徑轉染進細胞后,Cas9在特異的位點對目標基因組進行切割,引起DNA雙鏈斷裂 (double-strand break, DSB),然后通過非同源末端連接(nonhomologous end joining, NHEJ)或同源重組(homologous recombination, HR),產生DNA的插入、刪除或者依賴于含有特異突變的同源模板,進行目的位點的定向改造。基因編輯的結果可以采用DNA測序方法進行確認。當樣本或靶位點較多時,傳統的Sanger測序無法快速有效地鑒定基因編輯效率,適合采用高通量測序,即通過對靶基因區域附近設計引物,進行PCR擴增,然后對擴增子(amplicon)測序,可以快速高效地獲得目標區域的突變頻率信息,尤其是對低頻突變的檢測效果遠遠優于一代測序。而不同的高通量測序平臺測序的最大讀長不一樣,因此要注意擴增產物的長度和測序引物的位置。泓迅科技的擴增子測序技術可用于檢測CRISPR/Cas9基因組編輯的結果和分析脫靶效應,有助于研究人員快速定位基因突變位點和研究基因功能。

CRISPR/Cas9擴增子測序

服務優勢

  1. 高覆蓋率:一次上機可以進行數百到數千個擴增子的多重分析
  2. 高靈活性:可用于各種突變驗證和篩選遺傳變異
  3. 提供個性化分析服務:專業的生物信息團隊和大型計算機,可以提供個性化的生物信息分析服務
  4. 高性價比:與全基因組測序相比,大大減少測序成本和周期

技術路線

CRISPR-Cas9技術路線

服務詳情

擴增子長度 樣本要求 測序平臺 價格 周期 交付內容
50-150bp ? 需要PCR 產物或者提取好的基因組
? 客戶富集好的靶向區域PCR產物,建議濃度大于10 ng/μL,總量1-5 μg,以Qubit 2.0檢測結果為準
? 客戶需要提供擴增引物以及參考序列
Illumina 2×150 bp 1500元起/5G 3周 ? FASTQ格式的原始數據
? 數據分析報告
150-350bp Illumina 2×250 bp 咨詢
>350bp MiSeq 2×300 bp 咨詢 咨詢

*表中的價格和周期僅適用于PCR產物建庫的情況,PCR-free建庫需咨詢

訂購與咨詢

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  2. 電話咨詢:您可以直接撥打免費熱線4000-973-630(按1)聯系我們經驗豐富的工程師
  3. 在線咨詢:您有任何技術問題均可與我們進行網頁在線互動